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    產品列表PRODUCTS LIST

    PCR鑒定試劑盒

    簡要描述:

    PCR鑒定試劑盒的類別有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒。

    更新時間:2019-11-20

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    PCR鑒定試劑盒

    產品名稱:PCR鑒定試劑盒
    英文名稱:Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR
    規格:50T
    儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
    運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
    產品特點:
    ◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
    ◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
    ◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
    ◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
    準備物品:
    清理液(A)                                   毫升
    染色液(t B)                                   微升
    稀釋液(C)                                   毫升
    溶解液(tD)                                   毫升
    產品說明書                                   1份

    PCR反應的特異性決定因素為:
    ①引物與模板DNA特異正確的結合;
    ②堿基配對原則;
    ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
    ④靶基因的特異性與保守性。
    其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
    (2) 靈敏度高
    PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
    (3) 簡便、快速
    PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
    (4) 對標本的純度要求低
    不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
    注意事項:
    ①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
    ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
    ③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
    ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
    ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
    ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
    ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
    ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
    ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

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    Acinetobacter baumannii鮑氏不動桿菌(鮑曼不動桿菌)染料法熒光定量PCR試劑盒
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    反應五要素:
    參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
    ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
    ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
    ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
    ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
    ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
    ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
    引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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