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    產品列表PRODUCTS LIST

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    NADPH氧化酶(NAO)試劑盒品牌

    簡要描述:

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    更新時間:2022-01-27

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    NADPH氧化酶(NAO)試劑盒品牌

    產品簡介:

    產品名稱:NADPH氧化酶(NAO)試劑盒品牌

    規格:24樣 48樣

    貨號:AS038

    檢測方法:可見分光光度法 微板法

    產品分類:氧化應激系列

    貯存溫度:2~8℃。

    本試劑盒保質期:6個月。本產品僅用于科研實驗。

    試劑的組成和配制:

    提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

    試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

    試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。23.png

     

    所需的儀器和用品:

     

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    ① 組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

    ② 細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

    4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

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    NADPH氧化酶(NAO)試劑盒品牌621-82-9桂;Cinnamic acid 規格: 100mg

    548-04-9金絲桃 規格: 10mg

    139264-17-8佐米曲普坦 規格: 100mg

    大黃 對照品 規格: 20mg;98.5%

    56-45-1L- 規格: 20mg

    異亮氨 規格: 20mg

    97792-45-5氫高烏甲 規格: HPLC≥98%;20mg

    50-81-7C 規格: 20mg

    16562-13-3左旋千金藤啶;L-Stepholidi 規格: 20mg

    59-67-6煙 規格: 20mg

    操作步驟:

    實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

    1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

    2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

    3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

    4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

    5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

    6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

    7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

    8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

     


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