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    ELISA試劑盒使用技巧大集合
    點擊次數:208 發布時間:2022-05-05

    ELISA試劑盒使用技巧大集合 :

    1.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

    2.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

    3.要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

    4.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

    5.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。

    6.加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。

    7.顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。

    8.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

    9.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。

    10.液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。

    11.作時必須戴手套,穿工作衣,嚴格健全和執行消毒隔離制度。

    12.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。

    13.樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。

    14.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

    15.不同批號試劑組分不得混用。16.實驗洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

    16.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。   

    17.用于檢測的樣品應保持新鮮。

    18.用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。

    19.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是之后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。

    20.要確保微量加樣器的準確性,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質,溫度環境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其高量程和低量程進行確定。

    21.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

    22.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

    23.檢測吸光度前應將酶標儀打開,將其預熱30min以上。

    24.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應盡量避免接觸皮膚。

    25.孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

    26.對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

    27.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。

    28.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只要取出所需量。

    29.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確。吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

    30.將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會自然流下去。吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。


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